2月18日出版的美國光學(xué)學(xué)會(huì )旗下期刊Optics Express 同時(shí)刊登了中國科學(xué)院西安光學(xué)精密機械研究所瞬態(tài)光學(xué)與光子技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗室姚保利研究組的三篇研究論文。
在第一篇題為Large-scale 3D imaging of insects with natural color 的文章中，研究人員實(shí)現了大尺寸昆蟲(chóng)自然色三維高分辨率定量成像。經(jīng)過(guò)億萬(wàn)年的進(jìn)化，生物結構非常復雜與精巧，并承載了多樣的功能和迷人的景象。生物結構在不同尺度、不同維度和不同部位的觀(guān)察與形態(tài)分析，為科學(xué)研究結果提供最直接的證據，在眾多學(xué)科領(lǐng)域扮演著(zhù)不可或缺的角色。目前高分辨率三維成像技術(shù)已經(jīng)在生物學(xué)領(lǐng)域有了廣泛的應用，并推動(dòng)著(zhù)生物學(xué)研究不斷取得新的進(jìn)展。但是已有的技術(shù)與研究工具還存在一些不足，比如對大樣品進(jìn)行三維成像時(shí)數據量大且耗時(shí)，高分辨率與大成像視場(chǎng)難以同時(shí)滿(mǎn)足，樣品自然色彩難以獲取等。因此，尋找一種能夠對昆蟲(chóng)進(jìn)行快速三維成像，并獲得其高分辨形貌信息和色彩信息的設備，就成了昆蟲(chóng)分類(lèi)學(xué)家和相關(guān)研究領(lǐng)域的迫切需要。
為了解決這些問(wèn)題，課題組在前期工作的基礎上，與中科院動(dòng)物研究所合作，通過(guò)對彩色結構照明光學(xué)成像系統和相關(guān)算法進(jìn)行改造升級，克服了已有三維成像方法的缺陷，大大提升了系統的光能利用率和照明均勻性，使得成像系統在高分辨率、大尺寸、三維、快速、全彩色和定量分析等六大成像要素上均得到有效提升。該研究對大尺寸昆蟲(chóng)的高分辨三維定量分析具有重要的參考意義，同時(shí)為昆蟲(chóng)結構色的研究提供了新的技術(shù)手段，在進(jìn)化生物學(xué)、仿生學(xué)、分類(lèi)學(xué)、功能形態(tài)學(xué)、古生物學(xué)和工程學(xué)等領(lǐng)域具有廣泛的應用前景。
在第二篇題為Real-time optical manipulation of particles through turbid media 的文章中，研究人員主要實(shí)現了透過(guò)散射介質(zhì)后對微粒的實(shí)時(shí)光學(xué)微操縱。2018年諾貝爾物理學(xué)獎的一半授予了光鑷的發(fā)明人Arthur Ashkin，在那里激光捕獲和操縱微粒是在透明和無(wú)散射介質(zhì)中進(jìn)行的。而當光學(xué)系統中有散射介質(zhì)存在時(shí)，成像目標難以在像面清晰呈現，激光也難以聚焦成為一個(gè)焦點(diǎn)。目前有多種方法來(lái)克服散射的影響，其中最常用的方法是利用光場(chǎng)調控器件和相應的優(yōu)化算法對經(jīng)過(guò)散射介質(zhì)后的光場(chǎng)進(jìn)行調控。遺傳算法具有收斂速度快、抗噪聲能力強的優(yōu)勢已經(jīng)被廣泛應用于散射介質(zhì)后的光場(chǎng)聚焦和成像，然而遺傳算法在實(shí)際應用中依然存在一些問(wèn)題，比如隨著(zhù)優(yōu)化的進(jìn)行，其收斂速度逐漸變慢，噪聲對最終聚焦結果影響較大，優(yōu)化結果受探測器動(dòng)態(tài)范圍限制等。近年來(lái)，隨著(zhù)相關(guān)技術(shù)的成熟，已有研究者將波前矯正技術(shù)和光學(xué)捕獲結合，實(shí)現利用散射光場(chǎng)對微粒的捕獲，但是此類(lèi)技術(shù)在散射介質(zhì)后產(chǎn)生的聚焦光場(chǎng)質(zhì)量不高，而且無(wú)法實(shí)現在散射介質(zhì)后特定目標點(diǎn)對微粒的捕獲，也無(wú)法在散射介質(zhì)后沿特定路徑對粒子進(jìn)行操控，靈活性以及應用場(chǎng)合受到限制。
為了實(shí)現對經(jīng)過(guò)散射介質(zhì)后光束的高質(zhì)量聚焦并將其應用于實(shí)際，該文提出了一種相間分區域波前校正方法，實(shí)現了入射光經(jīng)過(guò)散射介質(zhì)后單點(diǎn)和多點(diǎn)的重新聚焦。將該方法和光鑷技術(shù)結合，可以對散射介質(zhì)后單一粒子和多個(gè)粒子的同時(shí)捕獲，并且可以實(shí)現在散射介質(zhì)后某一平面內沿特定軌跡對微粒的操縱。與傳統遺傳算法相比，該方法具有收斂速度快、聚焦強度高、對探測器動(dòng)態(tài)范圍需求小的優(yōu)點(diǎn)，大大提高了光經(jīng)過(guò)散射介質(zhì)后的聚焦效果，不僅可以應用于光學(xué)微操縱，而且可以應用于其它相關(guān)領(lǐng)域，為散射介質(zhì)后的物體成像、深層樣品熒光顯微成像以及散射介質(zhì)后的光場(chǎng)調控提供了有效手段。
在第三篇題為Three-dimensional space optimization for near-field ptychography 的文章中，研究人員實(shí)現了近場(chǎng)疊層成像術(shù)的三維空間優(yōu)化。疊層成像術(shù)（Ptychography）是一種無(wú)透鏡的相干衍射成像技術(shù)，擁有大視場(chǎng)、高分辨和定量相位的優(yōu)勢。通過(guò)記錄多幅交疊的衍射圖像，利用交疊區域的數據冗余和先進(jìn)的相位恢復算法，能恢復出物體的透射率函數分布、分解相干態(tài)以及校準系統誤差。這一無(wú)透鏡的成像方法已經(jīng)成功應用于可見(jiàn)光、電子波段和X射線(xiàn)波段。然而，疊層成像術(shù)在實(shí)際應用過(guò)程中依然存在一些限制，比如在針對三維厚樣品成像時(shí)，其厚度是未知的，傳統成像方法是盡可能減小對樣品每一層的成像厚度，這就增加了成像的層數，而且該方法只適用于連續樣品，對于離散的有著(zhù)非均勻空間分布的樣品則可能會(huì )出現偽影，額外的空白層也會(huì )降低圖像質(zhì)量。
該文提出一種基于遺傳算法的三維疊層成像算法（GA-3ePIE），可同時(shí)優(yōu)化層數與層距，并且適用于近場(chǎng)三維疊層成像術(shù)。相比于遠場(chǎng)，它可以使用更少的圖像重構相同大小的視場(chǎng)，而且對光源相干性以及探測器動(dòng)態(tài)范圍要求更低。通過(guò)分析發(fā)現，隨著(zhù)交疊率和采樣率的提升，可恢復層數變多。該算法也能被推廣到X射線(xiàn)及電子波段領(lǐng)域，同時(shí)也可以用于其它計算成像技術(shù)，如傅里葉疊層顯微成像術(shù)。
姚保利團隊多年來(lái)一直致力于新型光學(xué)成像及光學(xué)微操縱新方法、新技術(shù)和新儀器的研究和開(kāi)發(fā)，已在PRL、PRA、OL、OE 等國際期刊上發(fā)表200多篇研究論文，授權多項國家發(fā)明專(zhuān)利。2013年在國際上首次提出并實(shí)現了基于數字微鏡器件（DMD）和LED照明的結構光照明顯微成像技術(shù)，分辨率達到90nm，該成像設備已成功應用于多項生命科學(xué)研究之中。研究團隊先后為國內外多所大學(xué)研制了多套激光光鑷微操縱儀，設備性能穩定可靠，獲得用戶(hù)的普遍好評。
圖1. 兩種中華虎甲的三維成像結果。(a) 虎甲1的最大值投影圖（4X, NA0.2），其三維成像體積約為18.7 x 9.4 x 7.0 mm3。(b) 利用20X, NA0.45物鏡對圖(a)中紅色方框內區域進(jìn)行成像的最大值投影結果。(c) 圖(b)的三維形貌信息。(d) 圖(c)中藍色曲線(xiàn)所經(jīng)過(guò)的復眼的三維輪廓曲線(xiàn)。(e) 虎甲2的最大值投影（4X, NA0.2），其三維成像體積約為19.5 x 8.3 x 6.6 mm3。(f) 利用20X, NA0.45物鏡對圖(e) 中紅色方框內區域進(jìn)行成像的最大值投影結果。(g) 圖(f)的三維形貌信息。(h) 圖(g)中藍色曲線(xiàn)所經(jīng)過(guò)的復眼的三維輪廓曲線(xiàn)。
圖2. 激光透過(guò)散射介質(zhì)后對微粒的捕獲和操縱實(shí)驗結果。(a)-(e)散射介質(zhì)后操縱微粒沿矩形軌跡運動(dòng)；(f)-(j)散射介質(zhì)后操縱微粒沿圓形軌跡運動(dòng)（標尺：10μm）
圖3. 不同參數下USAF分辨率板的強度恢復結果。（a）單層重構結果。（b1-b2）和（c1-c2）不同層距下兩層重構結果。（d1-d3）三層重構結果，包含一層空白層。（e1-e2）和（f1-f2）使用GA-3ePIE算法下的重構結果及放大圖。（g）一張典型的衍射圖。
